醫學微生物學/鉤端螺旋體
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鉤端螺旋體(Leptospira)簡稱鉤體,種類很多,可分為致病性鉤體及非致病性鉤體兩大類。致病性鉤體能引起人及動物的鉤端螺旋體病,簡稱鉤體病,是在世界各地都廣泛流行的一種人畜共患者,我國絕大多數地區都有不同程度的流行,尤以南方各省最為嚴重,對人民健康危害很大,是我國重點防治的傳染病之一。
目錄 |
一、生物學性狀
(一)形態、結構、染色及培養
菌體纖細,長短不一,一般為6~20um,寬0.1~0.2um,具有細密而規則的螺旋,菌體一端或兩端彎曲呈鉤狀,常為「C」、「S」等形狀。在暗視野顯微鏡下可見鉤體象一串發亮的微細珠粒,運動活潑,可曲屈,前後移動或圍繞長軸作快速旋轉(見圖16~2)。
圖16~2 鉤端螺旋體(暗視野映光法)
電鏡下鉤體為圓柱狀結構,最外層是鞘膜,由脂多糖和蛋白質組成,其內為胞壁,再內為漿膜,在胞壁與漿膜之間有一根由兩條軸絲扭成的中軸,位於菌體一側。鉤體是以整個圓柱形菌體纏繞中軸而成,鉤體的胞壁成份與革蘭氏陰性桿菌相似。
鉤體革蘭氏染色為陰性,不易被鹼性染料著色,常用鍍銀染色法,把菌法染成褐色,但因銀粒堆積,其螺旋不能顯示出來。
鉤體是唯一可用人工培養基培養的螺旋體,最適濕度8~30℃,pH7.2~7.5,常用柯索夫(Korthoff )氏液培養基培養,生長緩慢,接種後3~4天開始繁殖,1~2周後,液體培養基呈半透明去霧狀混濁生長。
(二)抵抗力
鉤體對理化因素的抵抗力較其他致病螺旋體為強,在水或濕土中可存活數周至數月,這對本菌的傳播有重要意義,該螺旋體對乾燥、熱、日光直射的抵抗力均較弱,56℃10分鐘即可殺死,60℃只需10秒,對常用消毒劑如0.5%來蘇、0.1%石炭酸、1%漂白粉等敏感,10~30分鐘可殺死,對青黴素、金黴素等抗生素敏感。
(三)抗原構造與分型
致病性鉤體的抗原組成比較複雜,與分型有關的抗原主要有兩種:一種是表現抗原(P抗原),另一種是內部抗原(S抗原);前者存在於螺旋體的表面,為蛋白質多糖的複合物,具有型特異性,是鉤體分型的依據;而後者存在於螺旋體的內部,是類脂多糖複合物,具有屬特異性,為鉤體分群的依據。目前全世界已發現20個血清群,200多個血清型,我國至少發現了18個血清群,70多個血清型。
二、致病性
(一)致病物質
1.溶血毒素:不耐熱,對氧穩定,具有類似磷脂酶的作用,能使細胞膜溶解,當注入小羊體內時,可使小羊出現貧血、出血壞死、肝腫大與黃疸、血尿等。
2.細胞毒因子:在試管內對哺乳動物細胞有致細胞病變作用,小鼠腦內接種1~2小時後出現肌肉痙攣,呼吸困難,最後死亡。
3.內毒素樣物質;其性質不同於一般細菌的內毒素,但也能使動物發熱,引起炎症和壞死。
此外,鉤體在宿主體內的代謝產物如有毒脂類以及某些酶類:如脂酶、脫氫酶、萘醯氨酶、三油酸脂酶、脲酶等,可損害毛細血管壁,使其通透性升高,引起廣泛出血,對腎也有損害,可致血尿、蛋白尿等。
(二)致病過程及臨床類型
鉤體病為自然疫源性疾病,在野生動物和家畜中廣泛流行。鉤體在腎小管中生長繁殖,從尿中排出。腎長期帶菌的鼠和豬是鉤體的重要儲存宿主和傳染源。豬、鼠的尿污染的水源、稻田、小溪、塘水等稱為疫水,人在參加田間運動、防洪、捕魚等接觸疫水時,由於鉤體有較強的侵襲力,能穿過正常或破損的皮膚和粘膜,侵入人體。進食被病鼠排泄物污染的食物或飲水時,鉤體可經消化道粘膜進入人體,也可經胎盤感染胎兒引起流產;此外,鉤體還可經吸血昆蟲傳播。
人群普通對鉤體易感,但發病率高低與接觸疫水的機會和機體免疫力有關。以農民、支農外來人員、飼養員及農村青少年發病率較高。鉤體病主要有在多雨、鼠類等動物活動頻繁的夏、秋季節流行,這時節環境被鉤體污染嚴重,加這農忙,人們與疫水接觸機會多。
鉤體通過皮膚粘膜侵入機體,約在局部經7~10天潛伏期,然後進入血流大量繁殖,引起早期鉤體敗血症。在此期間,由於鉤體及其釋放的毒性產物的作用,出現發熱、惡寒、全身酸痛、頭痛、結膜充血、腓腸肌痛。鉤體在血中約存在一個月左右,隨後鉤體侵入肝、脾、腎、肺、心、淋巴結和中樞神經系統等組織器官,引起相關臟器和組織的損害和體征。由於鉤體的菌型、毒力、數量不同以及機體免疫力強弱不同,病程發展和症状輕重差異很大,臨床上常見有下列幾種類型:
1.流感傷寒型:是早期鉤體敗血症的症状,臨床表現如流感,症状較輕,一般內臟損害也較輕。
2.黃疸出血型:除發熱、惡寒、全身痛處還有出血、黃疸及肝腎損害症状。出血可能與毛細血管損害有關,即鉤體毒性物質損傷血管內皮細胞,使毛細血管通透性增高,導致全身器官,主要是肝、脾、腎點狀出血或瘀斑,表現為便血及肘細胞損傷,出現黃疸。
3.肺出血型:有出血性肺炎症状,如胸悶、咳嗽、咯血、紫紺等,病情兇險,常死於大咯血,死亡率高。
此外,尚有腦膜腦炎型,腎功能衰竭型,胃腸炎型等,均表現相應器官損害的症状;部分病人還可能出現恢復期併發症,如眼葡萄膜炎、腦動脈炎、失明、癱瘓等,可能是由於變態反應所致。
鉤體菌型與鉤體臨床分型無固定關係,臨床分型隨病情發展也可變動。
三、免疫性
感染早期機體可通過非特異性免疫殺滅鉤體,但作用不強。感染1~2周後血中可出現特異性抗體,具有調理、凝集和溶解鉤體,增強吞噬細胞的吞噬作用。特異性抗體出現後可迅速清除血中鉤體,一般7~10天可把器官中的鉤體清除,但腎臟中鉤體受抗體影響較小,維持時間長。故尿中可較長時間(數周~數年)排菌。
鉤體隱性感染或病後可獲得對同型鉤體的持久免疫力,以體液免疫為主,細胞免疫作用不大。
四、微生物學檢查
(一)病原學檢查
發病一周內取血液,第二周以後取尿,有腦膜炎型症状者取腦脊液進行檢查。
1.顯微鏡檢查 直接鏡檢: 取抗凝血1000轉/分、離心10分鐘,除去血細胞;血漿再以10000轉/分,離心40分鐘,棄上清取沉澱物暗視野顯微鏡檢查。染色鏡檢:塗片後用Fontana鍍銀染色鏡檢。另外,還可用免疫熒光法或免疫酶染色法檢查。
2.分離培養與鑒定 將血液數滴接種於柯氏(Korthoff)培養基(4.5~5ml),每份標本接種2~3管,於30℃培養5天,每隔3~5天,用暗視野顯微鏡檢查一次。如有鉤體生長,再傳代培養,用生長良好的菌液作鑒定,陰性者至少培養30~40天,仍未查到才能報告。尿液標本一般需濃縮(離心)後培養,培養時需加抑菌劑如5-氟尿嘧啶等;也可將標本接種於豚鼠腹腔進行分離。
(二)血清學試驗
一般在病初及發病2~3周各采血一次進行下列試驗。
1.顯微鏡凝集試驗
是目前常用的方法,用標準株或當地常見菌侏作抗原,分別與病人不同稀釋度的血清混合,在37℃作用2小時,然後滴片作暗視野顯微檢查。若待檢血清中有某型抗體存在,則在同型抗原孔中可見鉤體凝集成團,形如小蜘蛛,一般病人凝集效價在1:400以上或晚期血清比早期血清效價高4倍以上有診斷意義。
2.間接凝集試驗將鉤體屬特異性抗原吸附於載體上成為具有鉤體屬特異性的顆粒抗原,常用的載體有綿羊紅細胞、活性炭、乳膠顆粒等,這些抗原致敏的顆粒在玻片上與病人血清中相應的抗體作用,可出現肉眼可見的凝集。此法敏感性差,但快速簡便,尤其是炭凝集及乳膠凝集試驗,適於基層醫療單位作鉤體病的輔助診斷。
另外,補體結合試驗、間接免疫熒光試驗、ELISA等血清學方法亦可用於診斷。
五、防治原則
消滅傳染源:大力滅鼠,加強病畜管理。
切斷傳播途徑:保護好水源,避免或減少與疫水接觸。
3.提高易感人群免疫力:對流行區的居民、礦工、飼養員及外來易感人員進行多價鉤體死疫苗接種。
4.治療:鉤體對多種抗生素敏感,但以青黴素效果最好,對過敏者可用慶大黴素或金黴素。
參看
螺旋體 | 梅毒螺旋體 |
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