基礎檢驗學/腦脊液化學檢查

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臨床基礎檢驗學

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(一)PH

正常腦脊液PH 為7.13-7.34,比動脈血的 Ph 低。目前認為二氧化碳易通過血腦屏障,使腦脊液PCO2 比動脈血高0.5-1.5kpa(4-11mmHg) ,而[HCO-3]I 不易通過血腦屏障,腦脊液中濃度一般比動脈血低。腦脊液PH 比較恆定,即使全身酸鹼失衡時對它的影響也甚小,在中樞神經系統炎症時腦脊液PH 降低,比膿性腦膜炎的腦脊液的PH 降雨量低更明顯。如同時測定腦脊液的乳酸含量則更有價值。

(二)蛋白質

1 .蛋白質定性

[ 方法學評價 ]潘氏試驗所需標本量少,靈敏度高,試劑易得,操作簡便,結果易於觀察,其沉澱多少與蛋白質含量成正經比,部分正常腦脊液亦可出現極弱陽性結果。Ross Jine 試驗主在沉澱的是球蛋白,但敏感性較弱,NoneApett 試驗可分別檢測球蛋白和白蛋白,但操作較繁,極少選用。

2 .蛋白質定量

[ 方法學評價 ]比濁法經磺基水楊酸和三氯乙酯為基礎,在國內應用較廣,但受白蛋白/ 球蛋白的比值變化而影響結果,同時還受加試劑的手激動、速度、室溫和放置時間等影響,而且腦脊液用量相對較大。加一類是染料結合法、如考馬斯亮藍、麗春紅S 、鄰苯三酚紅鉬法等,具有靈敏度較高,標本用量少,重複性好等優點,但對PH 要求較嚴格。

[參考值 ] 腦脊液蛋白質的參考值因年齡和標本來源不同而有差異,成人腰池的蛋白質為200-400mg/L ,腦池蛋白質為100-250mg/L ,腦室內的蛋白質為50-150mg/L 。新生兒由於血腦屏障尚不完善。因此腦脊液蛋白質含量相對高些,6 個月後小兒腦脊液中的蛋白質相當於成人水平。

[臨床意義 ] 腦脊液蛋白質含量增加,提示患者血腦屏障受破壞,常見於腦、脊髓及腦膜炎的症、腫瘤出血等以及腦軟化、腦退化疾病神經根病變和引起腦脊液循環梗阻的疾病等,當腦脊液中蛋白質在10g/L 以上時,流出後呈黃色膠凍狀凝固,而且還有蛋白- 細胞分離現象,臨床上稱為Froin 症候群,是蛛網膜下腔梗阻性腦脊液的特徵。

含血的腦脊液可使蛋白質含量增加,為鑒別原來有無蛋白質增加,可用每微升 升個紅細胞的相當增加蛋白質80mg/L 來推算,最後用含血的腦脊液中實測的蛋白質量減去出血時從血中帶入的蛋白質量由含紅細胞數推算成的蛋白質量,即為原來腦脊液的蛋白質含量。

3 .蛋白電泳

[方法學評價 ]由於腦脊液蛋白質含量較少,在電泳前必須時行濃縮,一般用透析法,透析液可用高分子量聚乙三醇,右旋糖酐等,載體可用瓊脂糖凝膠、聚丙烯醯胺凝膠等電聚焦電泳,後者解析度高。近年來採用效毛細管電泳法其解析度更高,而且腦脊認不需要經過濃縮。

[參考值 ] 前白蛋白佔2-6% ,白蛋白 55%-65%,α 1球蛋白 3%-8% ,α2 球蛋白 4%-9%,β球蛋白 10-18%,γ球蛋白 4-13%(濾紙法)。

[臨床意義 ] 前白蛋白增加見於腦萎縮腦積水及中樞神經變性疾病。白蛋白增加見於腦血管病變、椎管阻塞。α和β球蛋白增加見於腦膜炎、腦腫瘤。β球蛋白增加可見於動脈硬化腦血栓脂肪代謝障礙性疾病。γ球蛋白明顯增加見於腦腫瘤。

4.免疫球蛋白

[參考值] 腦脊液中IGG為10-40mg/L,IGA為0-6mg/L,IGM為0-13MG/L.腦脊液IG濃度除以mg/L表示以外,還有以下幾種報告方式及參考值(見表15-1)。

表15-1 腦脊液免疫球蛋白的報告方式及參考值

報告方式 公式 參考值
GSF IGg 與 CSF 總蛋白比值 IGGcsf/TPcsf ≤0.105
CSF IGg 與 CSF 白蛋白比值 IGGcsf/Alb csf ≤0.28
CSF IGg 指數 IGGcsf/Alb csf/iggs/Alb s ≤0.7
CSF IGa 指數 IgaCSF/Alb csf/IGAs/Alb s ≤0.6
CSF IGm 指數 IGMcsf/Alb csf/IGMs/Alb s ≤0.06
IGg 合成率 5[(IGGcsf-IGGs/369)-(Albcsf-Alb s/230)(IGGs/Alb s)0.43 ≤3.3mg/d

[臨床意義 ] Igg 指數及合成率在 90% 的多發性硬化症中增高。但在非多發性硬化的其他感染或炎症時,仍有29-57% 病例也可異常。同時在確診為多發性硬化症的腦脊液電泳中,大多數還在陰極端出現異常的寡克隆區帶。後者是B 細胞通過接觸病原因子或多發性硬化症自身抗原後,活化成漿細胞。由多個活化漿細胞寡克隆化後所分泌的。但也親非多發性硬化症所特有,也可見於部分感染或炎症病例中。總之,腦脊液IGG 的定性懷定量檢查結果正常時,可除排多發性硬化症;相反檢查結果增高時,必須結合臨床才能診斷為多發性硬化症,當腦脊液總蛋白量正常,而又出現異常的寡克隆區帶時對多發性硬化症的診斷更具有重在意義。

IGA 增加見於化膿性、結核性腦膜炎神經梅毒等。

5 .髓鞘鹼性蛋白

[參考值 ] <4μ g/L

[ 臨床意義] 腦脊液髓鞘鹼性蛋白,測定已被子廣泛應用於多發性硬化症的輔助診斷,大約90% 多發性硬化症患者急性期MBP 升高是髓索遭到破壞的近期指標。該病消退後兩周可恢復至正常。雖然腦脊液中MBP 對多發性硬化症並非特異也可見於他急性中樞神經系疾病,如神經性梅毒、腦血管意外外傷等,但仍不失為多發性硬化症的輔助診斷指標。應注意不同實驗室由於方法不同,結果可有明顯差異,一般認為大於8 μ g/l 為異常。

(三)葡萄糖

[臨床意義 ] 腦脊液五管糖半定量法現已淘汰。目前已改用葡萄糖氧化酶已糖激酶的定量測定法,後者無論特異性、準確性均佳,如需將標本保存較長時間,可加入適量氟化鈉抑制細胞細菌利用葡萄糖。

[參考值 ]2.5-4.4mmol/L

[臨床意義 ] 腦脊液中葡萄糖和血糖有密切關係,腦脊液葡萄糖約為血糖的60% 。也可以在 30-90%範疇內變化,這是由於血漿葡萄糖達到平衡需1-2 小時。糖尿病或注射葡萄糖液使血糖升高後腦脊液中葡萄糖也可以升高。當中樞神經系統受細菌或真菌感染時,這些病原體或被破壞的細胞都能釋放出葡萄糖分解酶使葡萄糖消耗,而使腦脊液中葡萄糖降低,尤經化膿性腦膜炎早期降低最為時顯,甚至測定不出來。結核性、隱球菌性腦膜炎的腦脊液中葡萄糖降低多發生在中、晚期,且葡萄糖含量越低預後越差。病毒性腦炎時腦脊液中葡萄糖多為正常。

(四)氯化物

[參考值 ]120-130mmol/L

[臨床意義 ] 正常腦脊認氯化物比血漿高,0 這是因為腦脊液要維持Donnan 平衡所致腦脊液中氯化物也隨血漿氯化物的改變而變化。當腦脊液中蛋折質增多時,為維持腦脊認滲透壓平衡,氯化物多減少,如膿性腦膜炎,尤其以結核性腦膜炎時最為明顯的,在低氯血症嘔吐脫水等腦脊液氯化物也會減少。而病毒性腦炎時無顯著變化,腦脊液中氯化物含量低於85mmol/L 時,有可能導致呼吸中樞抑制而出現呼吸停止,故如腦脊液中氯化物明顯降低時應及時向臨床醫師通報,以便及早採取措施。腦肖液氯化物增加也可見於尿毒症患者。

(五)酶學檢查

正常腦脊液中含有多種酶如 Ld 、 CKAST 、 ALt 等。但其含量均較血清低得多。在某些伴有腦實質破壞疾病的時,AST 、 Ck 可以從腦組織釋放到腦脊液中使其活性增加。最近認為測定腦脊認中CK-BB 可作為院外心臟停搏患者大腦損傷的一個指標。腦脊液中LD 由於測定方法不同很難有一個公認的參考值,因此一般均以腦脊液LD/ 血清 Ld ,比值小於 0.1為判斷標準,許多中樞神經系統疾病無法可導致腦脊液LD 升遍,包括局部缺氧壞死腦膜白血病轉移性腫瘤、測定腦脊液LD 同工酶發現,如血腦屏障受破壞時,腦組織經釋放出LD2 、 LD3為主,如粒細胞增加則從細胞中主要釋放出LD4 LD5

有報告腦脊注中腺苷脫氨酶( adenosine deaminase,ADA )參考值為 0-8U/l 。關發現結核性腦膜炎患者腦膜炎患者脊液中ADA 升高,且與其它性質的腦膜炎相比有顯著性差異,可用於結核性腦膜炎的診斷及鑒別診斷,正常腦脊液中溶菌酶含量甚微,甚至測不出來。化膿性或結核性腦膜炎患者腦脊液中溶菌酶含量升高,而病毒草性腦炎則正常。結核性腦膜炎患者腦膜炎脊液中溶菌酶升高程度又明顯高於化膿性腦膜炎,且隨病情惡化而逐漸升高,隨著病情好轉又逐漸下降,痊癒後溶菌酶含量可下降至零,因此腦脊液中溶菌酶含量測定有助於結核性腦膜炎的診斷及預後判斷。

(六)氨和谷氨醯胺

在腦組織胺基酸代謝過程中脫作用所產生的游離氨,可借谷氨醯胺合成酶的作用合成谷氨醯胺以消除氨對中樞神經系統的毒性作用。腦脊液中氨大約是動脈血中的1/3 。當腦膜脊液中谷氨醯胺升高時也反映大禽中氨增加,並可用於診斷肝性腦病肝昏迷時可高達3.4mmol/L(<500mg/L) 。正常腦脊液中谷氨醯胺為0.4-0.96mmol/L(60-140mg/L)。但腦脊液的谷氨醯胺也可在敗血症腦病呼吸衰竭繼發性腦病時輕度增加。

(七)乳酸

正常腦脊液中乳酸為 1.55± 0.42mmol/l 。大腦發生病時通常有乳酸濃度增加,與動脈血中乳酸增高無關。治療中輸注乳酸並不會引起腦脊液中乳酸的增加。目前認為腦脊液中乳酸升高的來源有三:①大腦組織缺血、缺氧時乳酸堆集;②蛛網膜網腔下出血時紅細胞無氧酵解產生的乳酸或化膿性腦膜炎時細菌酵解葡萄糖均可使乳酸增加;③過度換氣引起腦脊液中乳酸升高。因此當蛛網膜下腔出血腦外傷癲癇、細菌隆腦膜炎時腦脊液中乳酸均有不同程度升高。有報告蛛網膜下腔出血患者腦脊液乳酸與出血時間有關,發現出血的當天乳酸水平即明顯增加,病情嚴重者,在出血後5天至7天內仍繼續升高,以後乳酸水平雖有下降,但一直高於正常,病情好轉後腦脊液乳酸值於2周內恢復至正常。

(八)3』5』-環磷酯腺苷(cAMP)

腦脊液中CAMP參考值為13.0±2.3nmol/L。腦膜炎時由於細胞代謝紊亂可導致腦膜脊認中CAMP含量升高。有報導化膿性腦膜炎患者檢測腦膜炎脊液中CAMP可能較蛋白質,葡萄糖以及細胞計數等指標更為敏感,恢復期腦脊認中CAMP逐漸下降至正常。

近來還對禽脊液中樂極生悲茶酚胺,5-HT乙醯膽鹼神經介質代謝物質進行測定,以觀察中樞神經活動與代謝情況以及估計用藥效果。

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