基礎檢驗學/腦脊液顯微鏡檢查
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(一)細胞計數
[方法學評價]一般工法。細胞少時應將腦脊液直接灌入FuchsRosenthal計數板,總體積為3。6μl中計當選,但願現用改良牛鮑氏計數盤的誤差更大,所以應增加計數面積。如果標本內細胞較多,可用生理鹽水或紅細胞稀釋液稀釋後再用人工計數,也可用血細胞分析儀進行計數。
當穿刺損傷血管導致血性禽脊應付或出血性腦血管病時,計數細胞總數已無意義,白細胞數亦須經校正辦法有二:①估計值:即以紅細胞與白細胞數之比為700:1的關係估計白細胞數。也有學齡前者認為蛛網膜下腔出血的患者在發病3-4天內進行腰穿刺時由於紅細胞破壞較早,應以每500個紅細胞比1個白細胞計數較為合適。②通過外周血紅細胞及白細胞數和腦脊液中紅細胞計當選出從血液中帶進腦脊液中白細胞數。以後者較為準確。
[參考值]成人腦脊液內無紅細胞,白細胞極少,其參考範圍:腰池中為(0-10)×106/L;腦室內為(0-5)×106/L,兒童為(0-15)×106/L,新生兒為(0-30)×106/L。如白細胞達(10-50)×106/L為輕度增加,(50-100)×106/L為中度增加,200×106/L以上顯著增加。
(二)白細胞分類
[參考值]正常腦脊液中白細胞主要為單個核細胞。多為淋巴細胞及單核細胞。偶可見到軟腦膜和蛛網膜細胞、室管膜細胞、脈絡膜細胞等。
(三)細胞學檢查
[方法學評價] 一般用腦脊液離心沉渣塗片,經瑞特染色後用油鏡分類,但細胞形成常受影響。為了儘可能多地收集細胞和保持完好的細胞結構,國內一些單位已將細胞玻片離心沉澱儀運用於腦脊液細胞學檢查,提高了癌細胞的檢出率,在細胞染色技術上也採用我種方法。目前常用染色方法為MayGnimwaldGiemsa染色法。其客觀存在如吖啶橙熒光染色法適用于于對瘤細胞的辨認;非特異性酯酶染色法適用腦脊液中T細胞辨認;高碘酸雪夫染色法用以鑒別腺癌細胞和原淋巴細胞;過氧化物酶染色用以鑒別形態相似的幼稚細胞;脂類染色法用於鑒別脂類吞噬細胞;硝基四氮唑染色法用於鑒定成熟和幼稚的中性粒細胞等。
(四)寄生蟲學檢查
經沉澱塗片認真尋找蟲卵、幼蟲等。
(五)顯微鏡檢查的臨床意義
1.中樞神經系統感染性關病此時腦脊應付細胞病理學變化分三個不同時期:①急性炎性滲出期,呈粒細胞反應;②亞急性增殖期,呈激活淋巴細胞或單核-巨噬細胞反應;③修復其呈淋巴細胞反應。化膿性腦膜炎的急性期變化最突出,持續時間最長;此期腦脊液細胞數每微升可高達數千,經中性粒細胞為產,當用抗生素治療後,腦脊液細胞數迅速下降。漬毒性腦炎亞急性期出現較早,持續時間較長,腦脊液中細胞數輕度增加,以淋巴細胞為主,在單純皰疹病毒性腦炎的腦脊液淋巴樣細胞中可發現胞質內包涵體,結核性腦膜炎時其腦脊液細胞數可增加,但超過500×106/L者較為罕見,在發病初期以中性粒細胞為主,但很快下降,由於患者多在發病數天後才來診治,因此首次腰穿時,腦脊液中中性粒細胞已趨下降而淋巴細胞為多。粒細胞、淋巴及漿細胞同時存在是結核性腦膜炎的特點。新型隱球菌性腦膜炎可在腦脊液中直接發現婚球菌,必要時用印度墨汁染色予以確診。
2.中樞神經系統腫瘤腦脊液細胞當選可正常或稍高,以淋巴細胞為主。腦脊液中能否找到腫瘤細胞取決於腫瘤位置及惡性程度、穿刺部位和採集標本的多少。同時也與檢查者技術水平有關,採用細胞正玻片離心沉澱儀可提高檢出率。腦脊液找到白血病細胞是白血病腦膜轉移的證據。
3.腦血管病腦脊液細胞學檢查有助於鑒別腦出血或腰穿損傷性出血。前者在早期病後數小時可見大量紅細胞和明顯中性粒細胞增多,2-3天內達高峰,在腦脊液中可發現吞噬細胞,出血後數小時至第3天可出現含有紅細胞的吞噬細胞,5天後可見含鐵血黃素吞噬細胞。如為穿刺損傷性出血則不會有上述反應。
4.腦寄生蟲病不僅腦脊液細胞數升高,並可見嗜酸性粒細胞增多,約佔白細胞的60%或更高。漿細胞增多為加一特點。如將腦脊液離心沉澱物全傾倒在玻片上,在顯微鏡下檢查可發現血吸蟲卵、阿米巴原蟲、弓形體、旋毛蟲的幼蟲等,甚至還可找至細粒棘球絛蟲的頭節或頭鉤。
5.紅斑狼瘡有時可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細胞。
常見中樞神經系統疾病的腦脊液檢查特點見表15-2。
表15-2 常見中樞神經系統疾病的腦脊液檢查特點
壓力(kpa) | 外觀 | 蛋白質 定性定量g/L |
葡萄糖(mmol/L) | 氯化物(mmol/L) | 細胞總數及分類 | 細菌 | |
正常人 | 臥位0.78-1.67 | 無色透明 | -~±+0.2-0.4 | 2.5-4.4 | 120-130 | (0-10)×106/L多為淋巴細胞 | 無 |
化膿性 腦膜炎 |
↑↑↑ | 混濁 有凝塊 |
2+以上↑+~2+↑ | ↓↓↓ | ↓ | 顯著增加,以中性粒細胞為主 增加,早期以中性粒細胞為主,其後以淋巴細胞為主 |
可發現至病菌找到抗酸性桿菌或結核培養陽性 |
結核性 腦膜炎 |
↑↑↑ | 毛玻璃樣混濁有薄膜形成 | ↑+ | ↓↓ | ↓↓ | 增加以淋巴細胞為主 | 無 |
病毒性 腦膜炎 流行性乙 型腦炎 |
↑ ↑ |
清晰或微混 清晰或 微混 |
↑+ ↑ |
正常 | 正常 | 增加早期以中性粒細胞為主期限後以淋巴細胞為主 | 無 |
新型隱球菌腦膜炎腦室及珠網膜下腔出血腦瘤 | ↑ | 清晰或 微混 |
↑ | ↓ | ↓ | 增加以淋巴細胞為產 | 新型隱球菌 |
↑↑ | 血性 | +~2+↑↑ | ↑ | 正常 | 無 | ||
增加以紅細胞為主 | |||||||
↑↑ | 清晰 | ↑+ | |||||
正常 | |||||||
腦脊髓 | ↑ | 清晰 | +↑ | 正常 | 增加以淋巴細胞為主 | 無 | |
梅毒 | 正常 | 增加以淋巴細胞為主 | 無 |
腦脊液化學檢查 | 腦脊液免疫學檢查 |
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