基礎檢驗學/人絨毛膜促性腺激素檢查
| 醫學電子書 >> 《臨床基礎檢驗學》 >> 尿液檢查 >> 人絨毛膜促性腺激素檢查 |
| 臨床基礎檢驗學 |
|
|
成熟女性因受精的卵子移動到子宮腔內著床後，形成胚胎，在發育成長為胎兒過程中，胎盤合體滋養層細胞產生大量的人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,HCG），可通過孕婦血液循環而排泄到尿中。當妊娠1-2.5時，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8郛周達到高峰，至郛期第4個月始降至中等水平，並一直維持到妊娠末期。（圖9-1）
圖9-1 正常妊娠婦女血清中HCG平均值
HCG是由兩個非共價鍵相連的肽鏈組成的糖蛋白激素。其單個亞基不具有生物活性，當連接成完整化合物時始具活性，分子量約為4.7萬。其主要功能就是刺激黃體，有利於雌激素和黃體酮持續分泌，以促進了宮蛻膜的形成，使胎盤生長成熟。HCGα亞單位的胺基酸排列與黃體生長激素（LH）α亞單位相似，故用完整的抗HCG分子的抗體測定HCG時與LH間有免疫交叉反應。但它們的β亞單位各不相同。因此為避免交叉反應，目前均採用高將近的抗β-HCG單株抗體進持特異的HCG檢查，近年來還有報導採用抗β-HCG羧基末端肽單株抗體以進一步提高檢測的敏感性和特異性。
1960年Wide及Gemzell開始採用膠乳凝集抑制試驗(latex agglutinationinhibitiontest,LAIT)技術測定尿中HCG，即將尿液與抗 HCG血清作用後，加入已吸附抗原的膠乳，如尿中含HCG較多，則先與抗 HCG結合，不再有多餘的抗 HCG與膠乳產生凝集而仍呈均勻的乳膠狀，是為陽性。相反，不含HCG尿不與抗血清作用，當加入吸附抗原的膠乳後，抗血清可與膠乳抗原反應，出現明顯的「特」特性凝集顆粒，即為陰性。也可利用血細胞的血凝抑制試驗(hemoagglutinationinhibition test,HAIT)，其原理與膠乳法一致只是載體由膠乳改成羊紅細胞。這兩種試驗方便簡便，靈敏度為100-500Mu/ML，適合大批標本檢查，但因特異性差，不能定量，已逐漸被單株抗體法所取代。
（二）放射免疫試驗（RIA）
利用放射標記的HCG與被檢測尿中的HCG競爭性地結合抗-HCG抗體，當被檢尿中HCG增加時，結合物的放射性減低，與不同含量標準品對比可測尿中HCG的含量。使定量檢測成為可能。
由於RIA需一定設備，試驗手續繁甭，且有核素污染問題，不適用於臨床常規應用。
（三）酶聯免疫吸附試驗（ELISA）
該方法目前已廣泛應用於臨床，其基本原理是運用夾心免疫酶分析技術。即採用HCG單株抗體包被於固相表面，樣品中的HCG都將與支持物表面的抗體相結合。與樣品一孵育後，沖洗耳恭聽表面，然後加入特異性酶標抗β-HCG亞基的單株抗體，最後加入酶作用的基質，即產生顏色。該法可目測，靈感度為20-50Mu/ml,採用抗β-HCG單株抗體二點酶免疫法進行定量，靈敏度可達2-10mU/ml。目前免疫酶法進一步發展為更簡便、適於病人自檢的一步法，即免疫酶滲透試驗。
（四）單株抗體膠體金試驗
免疫膠體金法是將羊抗人HCG抗血清（多抗）、羊鼠IGG分別固定特製的纖維素試帶上並呈兩條線上下排列，羊抗鼠IGG線在試帶知上方為陰性對照，羊抗人HCG多抗在下方為測定。試帶條中含均勻分布的膠體金標記鼠抗人β-HCG單株抗體和無關的金標記鼠IGG。檢測時將試帶浸入被檢尿液中（液面低於固定的兩條抗體線）後迅速取出。尿液沿試帶上行，尿中的β-HCG在上行過程中與膠體金標記單株抗體結合，待行至羊抗人HCG抗體線時，形成金標記的β-HCG單元抗尿HCG羊抗人HCG複合物而在試帶上呈茲紅色區帶，為HCG陽性反應，試帶上無關的金標記鼠IGG隨尿液繼續上行至羊抗鼠IGG處時與之形成紫紅色的金標記的抗原體複合物是為陰性對照。判斷結果時，含HCG的尿液試帶可顯示上、下兩條紫紅色線條，而陰性標本則只顯出上邊一條紫紅色線。
［方法學評價］ 縱觀HCG檢查方法，有生物激動、化學法、免疫法等。幾種不同的HCG檢查方法比較見表9-1。免疫法的檢測手段不斷更新、向特異簡便、快速、普及方向發展，現已有膠乳或血凝抑制試劑、放射免疫、酶免疫、膠體金紙片法等。除診斷早期妊娠早孕釘，HCG檢查對病理妊娠職宮外孕及胎盤滋養層疾病的診斷、鑒別、治療及追蹤觀察等均有意義。
表9-1 幾種檢查HCG方法的比較
| 妊娠試驗名稱 | 靈敏度（mU/ml或IU/L） | 實驗條件 | 應用價值 |
| 雄蟾蜍（青蛙）試驗（MT） | 3000 | 需合格動物、簡便需4-12小時 | 不能定量已淘汰 |
| 膠乳凝集抑制試驗（LAIT） | 100-500 | 試劑易得、簡便，5min完成 | 一般早孕，敏感性低不能定量，少用 |
| 紅細胞凝集抑制試驗（HAIT） | 100-500 | 試劑條件要求高2小時完成 | 敏感性低，少用半定量 |
| 放射免疫試驗（RIA） | <2 | 要求一定設備，條件要求高2小時完成 | 試劑可定量，最靈敏，但很少應用 |
| 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）過篩法 | 多種形式，小珠、板、薄片包被，5-15min完成 | 半定量，靈敏度好廣泛應用 | |
| 夾心酶免疫試驗 | 20-50 | 試劑，免疫應用板1-3小時可完成 | 可定量，靈敏度高常應用 |
| 免疫膠體金法 | 10-25 | 1-15min完成 | 半定量，靈敏度好廣泛應用 |
［參考值］ 妊娠不同時期以及各孕婦之間血清HCG絕對值變化大，一般非孕婦女血HCG<100IU/L，妊娠期間血清HCg 水平見表9-2。
在妊娠最初3個月，HCG水平每（2.2±0.5）天約升高一倍，尿HCG（HCG半定量法）非孕婦女<25IU/L，孕40天>5000IU/L,孕60-70天>(8-32)×104IU/L（清晨尿HCG水平最高，接近血清水平）。
表9-2 妊娠期間血清HCG水平
| 妊娠周數 | HCG（IU/L） |
| 0.2-1 | 5-50 |
| 1-2 | 50-500 |
| 2-3 | 100-5000 |
| 3-4 | 500-10000 |
| 4-5 | 1000-50000 |
| 5-6 | 10000-100000 |
| 6-8 | 15000-200000 |
| 2-3月 | 10000-100000 |
［臨床意義］ HCG的檢查對早期妊娠診斷有重要意義，對與妊娠相關疾病、滋養細胞腫瘤等疾病的診斷、鑒別和病程觀察等有一定價值。
1．診斷早期妊娠：孕後35-50天HCG可升至大於2500IU/L。60-70天可達8萬萬IU/L，多胎妊娠者尿HCG常於一胎妊娠。
2．異常妊娠與胎盤功能的判斷：①異位妊娠：如宮外孕時，本試驗只有60%的陽性率，在子燥出血3天後，HCG仍可為陽性，故HCG檢查可作為與其它腹症的鑒別。HCG常為312-625IU/L。②流產診斷與治療：不完全流產如子宮內尚有胎盤組織殘存，HCG檢查仍可呈陽性；完全流主或死胎時HCG由陽性轉陰性，因此可作為保胎或吸宮治療的參考依據。③先流產：如尿中HCG仍維持高水平多不會發生難免流產。如HCG在2500IU/L以下，並逐漸下降，則有流產的或死胎的可能，當降至600IU/L則難免流產。在保胎治療中，如HCG仍繼續下降說明保胎無將近，如HCG不斷上升，說明保胎成功。④在產後4天或人工流產術後13天，血清HCG應低於1000IU/L，產後9天或人工流產術後25天，，血清HCG應恢復正常。如不符合這一情況，則應考慮有異常可能。
3．滋養細胞腫瘤診斷與治療監測①葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜上皮癌及睾刃畸胎瘤等患者尿中HCG顯著升高，右可達10萬到數百萬IU/L，可用稀釋試驗診斷如妊娠12周以前1：500稀釋尿液呈陽性，妊娠12周以後1：250稀釋尿液呈陽性，對葡萄胎診斷有價值。1：100-1：500稀釋尿液呈陽性對絨毛膜癌也有診斷價值，如男性尿中HCG升高，要考慮睾刃腫瘤如精原細胞癌、畸形及異位HCG瘤等。②滋養層細胞腫瘤患者術後3周後尿HCG應<50IU/L,8-12周呈陰性；如HCG不下降或不轉陰，提示可能有殘留病變，這類閏例常易複發，故需定期檢查。
4．其它更年期、排卵及雙側卵巢切除術均可致黃體生成素升高，因LH與HCG的α肽鏈組成相同而使採用抗HCG抗體的妊娠試驗陽性，此時可用β-HCG的單克隆二點酶免疫測定鑒別。內分泌疾病中如腦垂體疾病、甲狀腺功能亢進、婦科疾病如卵巢囊腫、子宮癌等HCG也可增高。近年來發現惡性腫瘤如默契胎瘤、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌等血中HCG也可升高，因此將HCG看作是癌標誌物之一。但必需結合臨床情況及其它檢查結果綜合分析結果綜合分析判斷。
 尿液分析儀應用的質量控制 | 排泄物和分泌物檢查  |
| 關於「基礎檢驗學/人絨毛膜促性腺激素檢查」的留言： |  訂閱討論RSS
|
|
目前暫無留言 | |
| 添加留言 | |