金黃色葡萄球菌
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金黃色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人類的一種重要病原菌,隸屬於葡萄球菌屬(Staphylococcus),可引起多種嚴重感染。有「嗜肉菌"的別稱。
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生物學特性
典型的金黃色葡萄球菌為球型,直徑0.8μm左右,顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛,大多數無莢膜,革蘭氏染色陽性。金黃色葡萄球菌營養要求不高,在普通培養基上生長良好,需氧或兼性厭氧,最適生長溫度37°C,最適生長pH 7.4。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑1~2mm。血平板菌落周圍形成透明的溶血環。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10~15%NaCl肉湯中生長。可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產酸不產氣。甲基紅反應陽性,VP反應弱陽性。許多菌株可分解精氨酸,水解尿素,還原硝酸鹽,液化明膠。金黃色葡萄球菌具有較強的抵抗力,對磺胺類藥物敏感性低,但對青黴素、紅霉素等高度敏感。但由於抗生素濫用等原因,金黃色葡萄球菌對青黴素的耐藥性現已達到90%以上,並且據報導,現已出現耐萬古黴素的金黃色葡萄球菌菌株。
流行病學
金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在,空氣、水、灰塵及人和動物的排泄物中都可找到。因而,食品受其污染的機會很多。近年來,美國疾病控制中心報告,由金黃色葡萄球菌引起的感染占第二位,僅次於大腸桿菌。金黃色葡萄球菌腸毒素是個世界性衛生難題,在美國由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒,占整個細菌性食物中毒的33%,加拿大則更多,佔到45%,中國每年發生的此類中毒事件也非常多。
金黃色葡萄球菌的流行病學一般有如下特點:季節分布,多見於春夏季;中毒食品種類多,如奶、肉、蛋、魚及其製品。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報導。上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%,所以人畜化膿性感染部位,常成為污染源。
一般說,金黃色葡萄球菌可通過以下途徑污染食品:食品加工人員、炊事員或銷售人員帶菌,造成食品污染;食品在加工前本身帶菌,或在加工過程中受到了污染,產生了腸毒素,引起食物中毒;熟食製品包裝不密封,運輸過程中受到污染;奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時,對肉體其他部位的污染。
致病性
金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等,甚至敗血症、膿毒症等全身感染。金黃色葡萄球菌的致病力強弱主要取決於其產生的毒素和侵襲性酶:
- 溶血毒素:外毒素,分α、β、γ、δ四種,能損傷血小板,破壞溶酶體,引起肌體局部缺血和壞死;
- 殺白細胞素:可破壞人的白細胞和巨噬細胞;
- 血漿凝固酶:當金黃色葡萄球菌侵入人體時,該酶使血液或血漿中的纖維蛋白沉積於菌體表面或凝固,阻礙吞噬細胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化與此酶有關;
- 脫氧核糖核酸酶:金黃色葡萄球菌產生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫,可用來作為依據鑒定金黃色葡萄球菌;
- 腸毒素:金黃色葡萄球菌能產生數種引起急性胃腸炎的蛋白質性腸毒素,分為A、B、C1、C2、C3、D、E及F八種血清型。腸毒素可耐受100°C煮沸30分鐘而不被破壞。它引起的食物中毒症状是嘔吐和腹瀉。此外,金黃色葡萄球菌還產生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
腸毒素形成條件:
- 存放溫度,在37°C內,溫度越高,產毒時間越短;
- 存放地點,通風不良氧分壓低易形成腸毒素;
- 食物種類,含蛋白質豐富,水分多,同時含一定量澱粉的食物,腸毒素易生成。
金黃色葡萄球菌的檢驗
金黃色葡萄球菌的檢驗
樣品處理:無菌取25g或25mL食品樣品,放入225mL滅菌生理鹽水中均質,製成10-1稀釋液。
增菌培養:將10-1稀釋液接入7.5%NaCl肉湯或胰蛋白腖肉湯中,37°C培養24小時。
分離培養:將上述稀釋液或培養液分別劃線血平板和Baird-Parker平板,置37°C培養24~48小時。金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃或白色菌落,大而凸起,表面光滑,周圍有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落為圓形,直徑2~3mm,顏色灰或黑色,周圍有一渾濁帶。
染色觀察:從平板上挑取可疑性菌落進行革蘭氏染色,金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性,顯微鏡下呈葡萄狀排列無芽胞、莢膜,直徑0.5~1μm。
血漿凝固酶試驗:吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯24小時培養物充分混勻,置36±1°C培養,每隔半小時觀察一次,連續觀察6小時,出現凝固,即將小試管傾斜或倒置時,內容物不流動,判為陽性。同時做陰陽性對照。
耐熱核酸酶試驗:將24小時肉湯培養物沸水浴處理15min,用接種環劃線刺種於甲苯胺蘭-DNA平板,36±1°C培養24小時,在刺種線周圍出現淡粉色者為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。
金黃色葡萄球菌腸毒素檢測
金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測主要有動物試驗、血清學試驗、免疫熒光試驗及酶聯免疫吸附等方法。
金黃色葡萄球菌的控制
防止金黃色葡萄球菌污染食品
防止帶菌人群對各種食物的污染:定期對生產加工人員進行健康檢查,患局部化膿性感染(如疥瘡、手指化膿等)、上呼吸道感染(如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等)的人員要暫時停止其工作或調換崗位。
對肉製品加工廠,患局部化膿感染的禽、畜屍體應除去病變部位,經高溫或其他適當方式處理後進行加工生產。
防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成
應在低溫和通風良好的條件下貯藏食物,以防腸毒素形成;在氣溫高的春夏季,食物置冷藏或通風陰涼地方也不應超過6小時,並且食用前要徹底加熱。
感染者治療
有金黃色葡萄球菌感染者,可選用:紅霉素、新型青黴素、慶大黴素、萬古黴素或先鋒黴素Ⅵ治療。
參看
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