細胞周期
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生命是從一代向下一代傳遞的連續過程,因此是一個不斷更新、不斷從頭開始的過程。細胞的生命開始於產生它的母細胞的分裂, 結束於它的子細胞的形成,或是細胞的自身死亡。通常將通過細胞分裂產生的新細胞的生長開始到下一次細胞分裂形成子細胞結束為止所經歷的過程稱為細胞周期。在這一過程中,細胞的遺傳物質複製並均等地分配給兩個子細胞。
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細胞周期兩階段
細胞周期(cell cycle)是指細胞從第一次分裂結束產生新細胞到第二次分裂結束所經歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段。
(一) 間期
間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成後期(G2期)。
1. G1期 此期長短因細胞而異。體內大部分細胞在完成上一次分裂後,分化並執行各自功能,此G1期的早期階段特稱G0期。在G1期的晚期階段,細胞開始為下一次分裂合成DNA所需的前體物質、能量和酶類等做準備。
2. S 期 是細胞周期的關鍵時刻,DNA經過複製而含量增加一倍,使體細胞成為4倍體,每條染色質絲都轉變為由著絲點相連接的兩條染色質絲。與此同時,還合成組蛋白,進行中心粒複製。S期一般需幾個小時。
3. G2期 為分裂期做最後準備。中心粒已複製完畢,形成兩個中心體,還合成RNA和微管蛋白等。G2期比較恆定,需用1~1.5小時。
(二)分裂期
M 期:細胞分裂期。
細胞分裂期:前期,中期,後期,末期。
細胞的有絲分裂(mitosis)需經前、中、後,末期,是一個連續變化過程,由一個母細胞分裂成為兩個子細胞。一般需1~2小時。
1. 前期(prophase)染色質絲高度螺旋化,逐漸形成染色體(chromosome)。染色體短而粗,強嗜鹼性。兩個中心體向相反方向移動,在細胞中形成兩極;而後以中心粒隨體為起始點開始合成微管,形成紡錘體。隨著核仁相隨染色質的螺旋化,核仁逐漸消失。核被膜開始瓦解為離散的囊泡狀內質網。
2. 中期(metaphase)細胞變為球形,核仁與核被膜已完全消失。染色體均移到細胞的赤道平面,從紡錘體兩極發出的微管附著於每一個染色體的著絲點上。從中期細胞可分離得到完整的染色體群,共46個,其中44個為常染色體,2個為性染色體。男性的染色體組型為44+XY,女性為44+XX。分離的染色體呈短粗棒狀或髮夾狀,均由兩個染色單體借狹窄的著絲點連接構成。
3.後期(anaphase)由於紡錘體微管的活動,著絲點縱裂,每一染色體的兩個染色單體分開,並向相反方向移動,接近各自的中心體,染色單體遂分為兩組。與此同時,細胞波拉長,並由於赤道部細胞膜下方環行微絲束的活動,該部縮窄,細胞遂呈啞 鈴形。
4.末期(telophase)染色單體逐漸解螺旋,重新出現染色質絲與核仁;內質網囊泡組合為核被膜;組胞赤道部縮窄加深,最後完全分裂為兩個2倍體的子細胞。
G0期:暫時離開細胞周期,停止細胞分裂,去執行一定生物學功能的細胞所處的時期。
在體內根據細胞的分裂能力可把它們分為三類:①增殖細胞群,如造血幹細胞,表皮與胃腸粘膜上皮的幹細胞。這類細胞始終保持活躍的分裂能力,連續進入細胞周期循環;②不再增殖細胞群,如成熟的紅細胞、神經細胞、心肌細胞等高度分化的細胞,它們喪失了分裂能力,又稱終末細胞(end cell);③暫不增殖細胞群,如肝細胞、腎小管上皮細胞、甲狀腺濾泡上皮細胞。它們是分化的,並執行特定功能的細胞,在通常情況下處於G0期,故又稱G0期細胞。在某種刺激下,這些細胞重新進入細胞周期。如肝部分切除術後,剩餘的肝細胞迅速分裂。
細胞周期的DNA檢測
Ⅰ、樣品準備 準備以下一種或幾種樣品
B、組織培養細胞
C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞
Ⅱ、反應體系-DNA低滲緩衝液
檸檬酸三鈉 0.25g
Triton-X 100 0.75ml
Propidium iodide 0.025g
核糖核酸酶 0.005g
蒸餾水 250ml
我們將該DNA低滲溶液於密閉瓶子中存放數月後並無發現有任何染色活性的丟失
Ⅲ、染色
1、 每一個管子中放入1×106個細胞;
2、 樣品離心後儘可能完全地移去上清液,並且不要打碎沉澱塊;
3、 入1ml的DNA低滲染色緩衝液至沉澱中,並混勻;
4、 樣品於4℃下避光30分鐘或最長不超過1個小時以備流式細胞儀分析。
注意:延長在低滲緩衝液的曝光時間會引起樣品碎片的增加。
細胞周期檢測作為生物相容性評價指標
應用體外細胞培養法,觀察不同質量分數羥基磷灰石浸提液對L-929細胞的細胞學形態的影響,同時採用MTT比色法評價羥基磷灰石對L-929生長和增殖的影響,流式細胞儀檢測羥基磷灰石浸提液對L-929細胞生長周期及凋亡的影響。結果表明,羥基磷灰石浸提液對體外培養的細胞形態無明顯影響,對細胞生長和增殖無明顯抑制作用;不同質量分數材料浸提液的細胞毒性為 0~1級,隨羥基磷灰石浸提液質量分數的升高,細胞凋亡率逐漸上升;50%、75%、100%羥基磷灰石浸提液組能明顯降低G0 /G1 期細胞比例,增加S,G2 /M期細胞比例,能增加L-929細胞DNA的合成,促進細胞生長和組織修復。細胞周期檢測是生物材料生物相容性評價的一種可靠方法和指標。
細胞周期(細胞有絲分裂)口訣
有絲分裂並不難
間前中後末相連
間期DNA複製,蛋白質合成在其間
前期兩消和兩現
中期著絲點排列在中央赤道板
後期絲牽染體分兩組
末期兩消兩現壁重建
歷史上不同版本的定義
1、細胞周期是第一次分裂開始到第二次分裂開始所經歷的全過程。《普通生物學》陳閱增
2、細胞周期是第一次分裂結束到第二次分裂結束所經歷的全過程。《細胞生物學》
兩者區別是細胞分裂起點的不同。現在普遍接受的是第二種說法。
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