臨床生物化學/血氣分析儀分析方法

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(一)血標本採集

血氣分析標本的收集是極為重要的,若處理不當,將產生很大的誤差,甚至比儀器分析的誤差還大,因此必須引起足夠的重視。

血氣標本以采動脈血動脈毛細血管血為主,靜脈血也可供作血氣測定。只有動脈血才能真實反映體內代謝氧化作用酸鹼平衡的狀況,對O2檢測的有關指標必須採集進入細胞之前的動脈血,也就是血液中從肺部運氧到組織細胞之間的動脈血,才能真正反映體內氧的運輸狀態。動脈血液的氣體含量幾乎無部位差異,從主動脈到末梢循環都是均一的。

對PCO2和pH的檢測也以採集動脈血為好。血液循環無障礙的病人,靜脈血的這兩項指標基本也可反映體液酸鹼狀況。

⒈標本採取方法

⑴動脈血:肱動脈股動脈前臂動脈以及其他任何部位的動脈都可以進行采血。使用玻璃注射器采血,抗凝劑為肝素鈉。每支肝素鈉每亳升含12500U,相當於100mg,用20ml生理鹽水稀釋,分裝成40支,消毒備用(4℃貯存)。臨用時,注射器吸取肝素鈉溶液一支,而後將肝素液來回抽動,使針筒局部濕潤,多餘肝素液全部排出棄之,注射器內死腔殘留的肝素液即可抗凝。針刺動脈血管,讓注射器內芯隨動脈血進入注射器而自動上升,取1-2ml全血即可。拔針後,注射器不能回吸,只能稍外推,使血液充滿針尖空隙,並排出第一滴血棄之,讓空氣排盡,將塑料嘴或橡皮泥封住針頭,隔絕空氣,再把注射器來回搓滾,混勻抗凝血,立即送檢。或者採用微量取樣器採集血標本。

⑵動脈化毛細血管血:所謂動脈化的毛細血管血就是指局部組織末梢經45℃溫水熱敷,使循環加速,血管擴張,局部毛細血管血液中PO2和PCO2值與毛細血管動脈端血液中的數值相近,此過程稱為毛細血管動脈化。采血部位以手指耳垂嬰兒的手足跟及拇趾為宜。用45℃熱水敷局部,5-15min後或直至皮膚發紅,而後穿刺,穿刺要深,使血液快速自動流出,棄去第一滴血。不能擠壓,擠出的血液的測定結果不可信。未充分動脈化的毛細血管血的PO2測定值偏低,對pH、PCO2和HCO3的測定結果影響不明顯。

用肝素鋰抗凝比肝素鈉好,因為鋰含量(3.5%-4.5%)比鈉(9.5%-12.5%)少,可減少血中微纖維形成的可能;同時可排除了同一樣本測定鈉時出現錯誤的危險,特別是現在一些儀器將血氣與電解質測定配套進行,即一份全血既測定血氣又測定鈉鉀氯等電解質。

⑶靜脈血:靜脈血所測結果不適用於了解體內O2的運輸狀態,故PO2及有關推算數據僅供參考,對pH及PCO2等酸鹼平衡指標是適用的。采靜脈血儘可能不使用止血帶

⒉注意事項

⑴讓病人處於安定舒適狀態,臥床5分鐘後采血。

⑵在病人進行治療過程中采血要特別注意:①若進行輔助或人工呼吸時,采血前至少要等20分鐘,讓其在完全控制自如的人工呼吸狀態下采血。②若病人進行氧氣吸入時,作血氣測定,應注意氧氣流量,以備計算出該病人每分鐘吸入的氧含量。例如病人吸氧速度為6L/min,吸氧器的呼吸循環純氧氣為3L/min,其餘3L為周圍空氣(PCO2=0.209),因此病人每分鐘得到3L純氧及3×0.21=0.63L來自周圍空氣的氧氣,因此6L總體積中含有3.6L氧氣,含量為60%,此時PO2=0.6。③若是體外循環病人,應在血液得到混勻後再進行采血。

⑶抗凝劑以肝素鋰為好。對於同時作血氣、血鈣或血鋰的標本,則不能用肝素鋰抗凝,因為肝素可與部分鈣結合造成誤差,此時就要用鈣緩衝液肝素試劑抗凝。使用液體肝素抗凝劑濃度為500-1000U/ml為宜,含量過低,抗凝劑體積過大,易造成稀釋誤差;若含量過高也易引起誤差。最好使肝素鋰以均勻分布於毛細玻管周邊壁上為宜,對標本既無稀釋作用又有利於樣品的抗凝。

⑷注意防止血標本與空氣接觸,應處於隔絕空氣的狀態。因為:①空氣中PO2高(21.17kPa或150mmHg)於血液,PCO2低(0.040kPa或0.3mmHg)於血液,一旦血液與空氣接觸,大氣中O2會從高壓的空氣中進入血液,造成血液PO2高的誤差;CO2又會從高壓的血液彌散到大氣中,使血液PCO2測出結果偏低。大於標本10%的空氣氣泡會明顯影響PO2值。②與空氣接觸,易造成空氣污染血標本。

⑸標本放置時間:采出的全血中有活性紅細胞,其代謝仍在繼續進行,O2不斷地被消耗,CO2不斷地產生。有報導標本於體外37℃保存,每10分鐘PCO2約增加1mmHg,pH值降低約0.01單位。血樣於4℃保存1小時內,其中pH、PCO2值沒有明顯變化,PO2值則有改變。按要求,採取的血標本應在30分鐘內檢測完畢,如30分鐘後不能檢測,應將標本置於冰水中保存,最多不超過2小時,在30分鐘到2小時之間,血PO2值是個懷疑值,僅供參考。

⑹采末梢血須是動脈化的毛細血管血,只有高灌注局部組織的代謝變化,其靜脈血pH、PCO2、PO2與動脈血所測值才非常接近。

(二)儀器操作簡介

目前使用的血氣分析儀生產廠家多,型號各異,但性能和操作大同小異。現以AVL995血氣酸鹼分析儀為例,簡要介紹該儀器的使用方法。

AVL945、995裝有PO2、PCO2和pH電極,直接測定全血,實際上是測定血漿PO2、PCO2和pH,因為這些電極直接接觸的標本是血漿,而未能伸入到紅細胞內。測出這三個指標後,再通過儀器運算出其他指標。

⒈啟動按儀器要求分別接通主機和空氣壓縮機電源,使空氣壓縮機壓力到達額定的要求。再開啟二氧化碳氣瓶,使CO2氣流量達到額定要求。分別檢查洗滌液、參比液、標準緩衝液1和2等液體是否按要求裝備。

⒉定標該機定標分兩種形式,即兩點定標和一點定標,與其他型號儀器一樣可進行總兩點自動定標。總兩點定標是先用兩種緩衝液對pH電極系統進行定標,再用混合後的兩種不同含量的氣體對PCO2和PO2電極進行定標。兩點定標是讓儀器建立合適的工作曲線。一點定標是每隔一定的時間檢查一下電極偏離工作曲線的情況。開機後,兩點定標自動進行是必須做的工作,並且不能中斷。進行過兩點定標後,儀器每隔12小時左右再自動進行下一次兩點定標,必要時可根據情況任意選用定標程序再定標。兩點定標後,每隔0.5-3小時,儀器用緩衝液1對pH電極系統進行一點定標。儀器還進行氣體定標,先用氣體2(CO2)對PCO2電極進行定標,最後用氣體1(混合氣)對PCO2和PO2電極進行定標。

⒊測量從開機到兩點定標完成後,儀器螢幕上顯示「READY」,即已準備好,此時可進行測量。一般測量用注射器進樣或毛細管進樣兩種方式進行。

⑴注射器進樣:按Syring(注射器)鍵,轉換盤轉到進樣位置,用注射器慢慢注入血樣,直到儀器螢幕顯示Measure(測量),下行顯示:拔出注射器,按START鍵。蠕動泵開始轉動,將血樣吸入測量室。當血樣到達pH參比電極時,蠕動泵停轉,血樣停留在測量室中,儀器自動進行測量和計算。與此同時,輸入病人Hb量及體溫數、測出的pH、PO2值及其計算值在螢幕顯示,並列印結果。由於AVL995Hb能自動測出病人血紅蛋白值,這種型號的儀器就可不必另輸Hb值,僅輸入體溫值即可。

測量一結束,儀器自動進行沖洗將血樣沖走,乾燥後,進行一點定標,然後返回READY狀態,又可接著進行第二個樣品的測量。

⑵毛細管進樣:在儀器處於RDADY狀態時,按Capillary鍵,轉換盤轉到進樣位置。在進樣口插入裝有血樣的毛細管,儀器便自動把血樣吸入測量室,並停留在測量室自動進行檢測,以下各種步驟與注射器進樣法相同。

⑶微量樣品測量法:當採集的血量不足40μl而又多於25μl時,儀器自動進行微量樣品測量。進樣後,儀器螢幕顯示「微量樣品」,下行顯示「只測pH按1,其餘按2」;如果還測pH、PCO2和PO2三個參數,需按「2」鍵。根據測量室血樣進入的位置交替按「START鍵」和「1」鍵,直至pH測量完。儀器經運算後,即可列印結果。進行微量樣品檢測時,一定要按血樣流動順序進行,認真操作,其所測值與全量血樣檢測結果基本一致。

⑷維護和保養:按說明書要求,對儀器要定期保養和維護。特別是對電極的定期保養極為重要。

使用操作人員,一定要熟悉儀器的測定原理、各部件的工作性能,並熟讀說明書,一般的故障應該學會處理,既大膽又心細。儀器一旦開機後,應該24小時連續開機使用,充分發揮儀器的效用,做到物盡其用。

32 血氣分析儀測定原理及儀器結構 | 血氣檢測的質量控制 32
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