臨床生物化學/核酸限制性片段長度多態性（RFLP）分析
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RFLP分析是限制性內切酶、核酸電泳、印跡（blot）技術、探針-雜交技術的綜合應用，多用於臨床遺傳性疾病的基因診斷。基本原理是遺傳性疾病多有基因的缺陷，如基因缺失、基因插入、編碼區小範圍核苷酸序列改變或點突變等。前二者可將純化的正常人和病人DNA同時用限制性內切酶切成片段，經電泳分離、印跡、探針雜交等找到目的基因。由於患者基因的缺失或插入，造成被限制性內切酶切開的片段（分子量）大小與正常人發生差異（限制性片段長度多態），使其電泳遷移率發生差異，而達到基因診斷的目的。小區域或點突變，可選用一個限制性內切酶的切點正好在這一變異位置，使切割作用和正常人發生差異（如正常人基因可切斷而患者不能，或反之），達到診斷目的。現在PCR產物經變性為DNA單鏈，用聚丙烯醯胺凝膠電泳分離，只要有一個核苷酸發生變異，其電泳遷移率就會改變，進行多態分析（PCR-SSCP）。實際上把基因的異常位置設計在PCR擴增區域內，就能進行多態分析。（圖18-8）
核酸純化→內切酶作用→電泳分離→Southern blot→探針-雜交→顯影，顯色
圖18-8 點突變Eco R1RFL
 核酸擴增技術 | 核酸一級結構（核苷酸序列sequence）分析  |
出自A+醫學百科 「臨床生物化學/核酸限制性片段長度多態性（RFLP）分析」條目 http://cht.a-hospital.com/w/%E4%B8%B4%E5%BA%8A%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%8C%96%E5%AD%A6/%E6%A0%B8%E9%85%B8%E9%99%90%E5%88%B6%E6%80%A7%E7%89%87%E6%AE%B5%E9%95%BF%E5%BA%A6%E5%A4%9A%E6%80%81%E6%80%A7%EF%BC%88RFLP%EF%BC%89%E5%88%86%E6%9E%90 轉載請保留此連結
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