重組率

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重組率

1、遺傳學重組率

交換值(重組率):指同源染色體的非姊妹染色單體間有關基因染色體片段發生交換的頻率,一般利用重新組合配子數佔總配子數的百分率進行估算。

交換值(%)=(重新組合配子數/總配子數)×100

交換值的幅度經常變化於0-50%之間:

影響交換值的因子:

1).性別:雄果蠅、雌蠶中未發現染色體片段發生交換;

2).溫度:家蠶第二對染色體上PS-Y(PS黑斑、Y幼蟲黃血)

飼養溫度(℃) 30 28 26 23 19

交換值(%) 21.48 22.34 23.55 24.98 25.86

3).基因位於染色體上的部位:離著絲點越近,其交換值越小,著絲點不發生交換。

4).其它:年齡、染色體畸變等也會影響交換值。

2、基因工程學重組率

重組率:連接反應結束後,含有外源DNA片段的重組分子數與加入的載體分子數之比。較為理想的重組率為25-75%

提高重組率的方法:

連接反應條件 外源片段:載體=2:1-10:1(分子數),增加碰撞機會,減少自身環化。

載體除磷 (磷酸酯酶5』除磷)。

TdT在3』端增加人工粘性末端,防止載體自我環化 。

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