生物安全櫃
| A+醫學百科 >> 生物安全櫃 |
生物安全櫃是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料，使其避免暴露於上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。
WHO《實驗室生物安全手冊》提出，生物安全櫃可以有效減少由於氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養物交叉污染。生物安全櫃同時也能保護工作環境。
事實上，生物安全櫃更側重於保護操作人員和環境，防止操作的病原微生物擴散造成人員傷害和環境污染。
根據生物安全防護水平的差異，生物安全櫃可分為一級、二級和三級三種類型。一級生物安全櫃可保護工作人員和環境而不保護樣品。其氣流原理和實驗室通風櫥基本相同，不同之處在於排氣口安裝有HEPA 過濾器，將外排氣流過濾進而防止微生物氣溶膠擴散造成污染。一級生物安全櫃本身無風機，依賴外接通風管中的風機帶動氣流，由於不能保護櫃內產品，目前已較少使用。
二級生物安全櫃是目前應用最為廣泛的櫃型。按照《中華人民共和國醫藥行業標準YY0569-2005生物安全櫃》中的規定，二級生物安全櫃依照入口氣流風速、排氣方式和循環方式可分為4 個級別：A1 型，A2 型，B1 型和B2 型。所有的二級生物安全櫃都可提供工作人員、環境和產品的保護。
A1 型安全櫃前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。無內部循環氣流，100%的氣體通過排氣口過濾排出。
A2 型安全櫃前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA 過濾器再循環至工作區，30%的氣體通過排氣口過濾排出。
二級B型生物安全櫃均為連接排氣系統的安全櫃。連接安全櫃排氣導管的風機連接緊急供應電源，目的在斷電下仍可保持安全櫃負壓，以免危險氣體泄漏如實驗室。其前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s(100fpm)。
B1 型70%氣體通過排氣口HEPA 過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA 過濾器再循環至工作區。
B2 型為100%全排型安全櫃，無內部循環氣流，可同時提供生物性和化學性的安全控制，可以操作揮發性化學品和揮發性核放射物作為添加劑的微生物實驗。
三級生物安全櫃是為生物安全防護等級為4級實驗室而設計的，櫃體完全氣密，工作人員通過連接在櫃體的手套進行操作，俗稱手套箱(Golve box)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全櫃以確保不受污染，適用於高風險的生物試驗，如進行SARS、伊波拉病毒相關實驗等。
根據生物安全櫃的強制性行業標準《中華人民共和國醫藥行業標準YY0569-2005生物安全櫃》規定，只有獲得國家食品藥品監督管理局頒發的三類醫療器械註冊證的產品才能真正保護操作人員、實驗室環境和操作樣本。
生物安全櫃提供對人\樣品和環境的三重保護.
生物安全櫃選購指南
生物安全櫃的選擇最基本取決於生物試驗中所使用的試驗品類型：
1、如果生物試驗中只涉及微生物樣品，可以使用基本類型的生物安全櫃；
2、如果生物試驗中涉及了微生物樣品和微量化學試劑（非腐蝕性），使用裝備外排管道的安全櫃是必要的。因為HEPA過濾器並不能有效過濾清除化學氣體，如果不能外排，將對實驗室內工作人員和環境造成威脅；
3、如果生物試驗中涉及了細胞毒素類藥物，例如各類癌症治療藥物，必須使用的細胞毒素安全櫃。
另外，需要明確了解生物安全櫃與通風櫃/超淨工作台的區分。通風櫃和超淨工作台不屬於生物安全櫃，不可使用在涉及微生物材料的實驗或生產過程中。
通風櫃（通風櫥）是為在化學實驗過程中清除腐蝕性化學氣體和有毒煙霧而設計的。由於沒有裝備HEPA過濾器，通風櫃不能有效清除微生物介質。放置在通風櫃內微生物樣品會散播到櫃外，污染實驗室環境。
超淨工作台（超淨台）是為了保護試驗品或產品而設計的，通過吹過工作區域的垂直或水平層流空氣防止試驗品或產品受到工作區域外粉塵或細菌的污染。一旦微生物樣品放置於工作區域，層流空氣將把帶有微生物介質的空氣吹向前台工作人員而產生危險。
生物安全水平
生物安全櫃的選擇需要根據所涉及微生物試驗品或產品的致命性，傳播媒介等因素，這些因素可劃分為一至四級生物安全水平(BSL)：
生物安全水平 致命性 媒介 可治癒性 範例
BSL-1 無或極低 液體 可以 BS*
BSL-2 一般 液體 可以 HIV
BSL-3 高 空氣 可以 TBC
BSL-4 極高 空氣 不可 Ebola
- Bacillus subtilis (草芽孢桿菌)
被分類為生物安全水平一級和二級的微生物試驗品或產品不會產生氣溶膠，因此在開放的實驗台面上開展工作；而對於一些可能涉及或者產生有害生物物質的操作過程都應該在生物安全櫃內進行，在這些條件下最好使用二級的生物安全櫃。二級生物安全水平的試驗品或產品是可以通過液體傳播，所以操作人員必須對於污染的銳器要特別注意。客戶在選購安全櫃時，也因注意確保沒有突出的銳角，在使用時也需要每天清理工作檯面。
在三級生物安全水平的生物實驗室中，所有與傳染源操作有關的步驟，都在二級或者三級生物安全櫃中進行，並由穿戴合適防護服的實驗人員進行；對於四級生物安全水平，所有工作應限制在三級生物安全櫃中；假若在二級生物安全櫃中進行，必須使用裝備生命支持系統的一體正壓防護服。值得特別注意的是，當出現新型不明微生物時，也必須在四級生物安全防護實驗室中進行。待有充分數據後再決定此種微生物或毒素應在四級還是在較低級別的實驗室中處理。
生物安全櫃的分類
實驗室生物安全等級 應用的生物安全櫃等級 所能提供的保護
人員 試驗品 環境
1-3 I 可 否 可
1-3 II(A1,A2,B1,B2) 可 可 可
4 III 可 可 可
生物安全櫃可分為一級、二級和三級三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。
一級生物安全櫃可保護工作人員和環境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風櫥一樣，不同之處在於排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全櫃都在排氣和進氣口使用HEPA過濾器。一級生物安全櫃本身無風機，依賴外接通風管中的風機帶動氣流，由於不能對試驗品或產品提供保護，目前已較少使用。
二級生物安全櫃是目前應用最為廣泛的櫃型。 與Ⅰ級生物安全櫃一樣，Ⅱ級生物安全櫃也有氣流流入前窗開口，被稱作「進氣流」，用來防止在微生物操作時可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級生物安全櫃不同的是，未經過濾的進氣流會在到達工作區域前被進風格柵俘獲，因此試驗品不會受到外界空氣的污染。 Ⅱ級生物安全櫃的一個獨特之處在於經過HEPA過濾器過濾的垂直層流氣流從安全櫃頂部吹下，被稱作「下沉氣流」。下沉氣流不斷吹過安全櫃工作區域，以保護櫃中的試驗品不被外界塵埃或細菌污染。
按照NSF49的中的規定，二級生物安全櫃依照入口氣流風速、排氣方式和循環方式可分為4個級別：A1型，A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二級生物安全櫃都可提供工作人員、環境和產品的保護。
A1型安全櫃前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，30%的氣體通過排氣口過濾排除。A2型安全櫃前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，30%的氣體通過排氣口過濾排除。A2型安全櫃的負壓環繞污染區域的設計，阻止了櫃內物質的泄漏。
二級B型生物安全櫃均為連接排氣系統的安全櫃。連接安全櫃排氣導管的風機連接緊急供應電源，目的在斷電下仍可保持安全櫃負壓，以免危險氣體泄漏如實驗室。其前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s(100fpm)。B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環至工作區。B2型為100%全排型安全櫃，無內部循環氣流，可同時提供生物性和化學性的安全控制。
二級生物安全櫃各櫃體類型性能比
三級生物安全櫃是為4級實驗室生物安全等級而設計的，是目前世界上最高安全防護等級的安全櫃。櫃體完全氣密，100％全排放式，所有氣體不參與循環，工作人員通過連接在櫃體的手套進行操作，俗稱手套箱(Golve box)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全櫃以確保不受污染，適用於高風險的生物試驗。
在允許循環化學氣體的操作條件下，可以使用外接排放管道蓋（Exhaust Collar）的A2型二級生物安全櫃。排放管道蓋與一般硬管不同的是有可吸入空氣的進氣孔；排放管道蓋與外排管道連接，然後接到一個外排風機。排放管道蓋上的進氣孔對於A2型二級生物安全櫃通過內置風機保持進氣流和下沉氣流的平衡至關重要。如果使用密封的外接風管，進氣流將會過強可能導致安全櫃對產品的保護實效；而排放管道蓋上的進氣孔可以從室內吸入空氣，而不會影響安全櫃內的氣流平衡。此條件只適用於微量有毒化學物質。
如果不允許循環化學氣體，則必須使用裝備硬管的B2型二級生物安全櫃。由於B型安全櫃不是獨立平衡系統，它的內置風機只能製造下沉氣流，安全櫃依賴外排風機製造進氣流。這種型號的安全櫃在安裝和維護時會較為複雜，因為外排風機必須與內置風機保持平衡，否則將導致對操作人員或產品的安全性能的失效。
細胞毒素安全櫃
如果生物試驗中涉及了細胞毒素類藥物，例如一些化學療法藥物，這些細胞毒素類藥物有極高的毒性；與微生物產品不同的是，它們不可以被福爾馬林或過氧化氫中和。而細胞毒素安全櫃是專門高毒性的細胞毒素類藥物試驗與生產設計的，主要特點之一是可以在風機運行時更換HEPA過濾器，這樣負壓可以保持，確保了維修人員的安全。
在2000年5月，歐洲標準化委員會(CEN)頒布了生物安全櫃歐洲標準EN12469:2000，正式替代了德國DIN 12950、英國BS5726和法國NF X-44-201等歐盟成員國生物安全櫃的標準，成為歐盟區域內生物安全櫃的統一標準。
NSF49在上世紀70年代就已經出現，被公認為目前生物安全櫃領域最完善的標準。在2002年，ANSI/NSF49正式獲得了美國國家標準學會（American National Standard Institute,ANSI）的官方認可，成為美國生物安全櫃的統一標準。
NSF/ANSI49和EN12469是目前世界上最通用的生物安全櫃國際認證，這兩種標準對安全櫃性能分級、安全性能檢測都有詳細的說明和要求。安全櫃標準對規範安全櫃市場，保護研究人員起到重要的作用。客戶在選購生物安全櫃時，除了了解安全櫃各項性能指標，最好最快最方便鑒別安全櫃安全性能的方法是了解您購買的安全櫃是否獲得過以上兩項最主要的國際安全櫃認證。
以上兩項最主要的國際安全櫃認證中，最重要的是測試安全櫃保護性能的微生物測試，就是使用細菌芽孢的微生物挑戰測試，包括以下三個面：
1、人員保護：細菌芽孢放置在工作區域，它們將不允許從前窗逃逸；
2、產品保護：從工作區域外向前窗開口處釋放細菌芽孢，通過測試的安全櫃將可以防止細菌芽孢進入工作區域污染試驗品；
3、交*感染：細菌芽孢在安全櫃內從一個位置釋放，它們將不允許落到超過20cm的臨近區域；
在微生物測試後，將可以得到安全櫃的安全性能範圍圖 (Performance Envelope) ，可以明確顯示生物安全櫃通過所有以上三種微生物挑戰試驗的風速設定點(Airflow setpoints)[進氣流速率範圍和下沉氣流速率範圍]。為了確保安全櫃在不同運行狀態下的安全性，用戶有必要向廠家索取相應型號安全櫃的安全性能範圍圖。 在尋求生產商產品認證的同時，用戶也需要注意以下事項：
1. 當生產商聲稱自己生產的安全櫃符合某項國際標準時，可要求其出示證明-合法的認證機構所簽署的獨立檢測報告；
2. 一些標準可能與安全櫃安全性能無直接關聯，例如生物安全櫃生產商聲稱獲得ISO9001質量認證，而ISO9001並不會對安全櫃性能進行以上國際安全櫃標準的檢測；
3. 認證必須是由獨立、合法的安全櫃認證機構測試和頒布的。
注意事項
1、操作者
生物安全櫃如果使用不當，其防護作用就可能大大受到影響。
2、紫外燈
生物安全櫃中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應該每周進行清潔，以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
3、明火
在生物安全櫃內所形成的幾乎沒有微生物的環境中，應避免使用明火。
4、溢出
實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規則，每一位使用實驗室的成員都要閱讀並理解這些規程。
5、認證
在安裝時以及每隔一定時間以後，應由有資質的專業人員按照生產商的說明對每一台生物安全櫃的運行性能以及完整性進行認證，以檢查其是否符合國家及國際的性能標準。
6、清潔和消毒
由於剩餘的培養基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結束時，包括儀器設備在內的生物安全櫃里的所有物品都應清除表面污染，並移出安全櫃。
7、清除污染
生物安全櫃在移動以及更換過濾器之前，必須清除污染。
8、個體防護裝備
在使用生物安全櫃時應穿著個體防護服。
9、警報器
可以在兩種警報器中選擇一種來裝備生物安全櫃。
| 關於「生物安全櫃」的留言： |  訂閱討論RSS
|
|
目前暫無留言 | |
| 添加留言 | |