基礎檢驗學/抗凝劑

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臨床基礎檢驗學

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抗凝劑種類很多,性質各異,必須根據檢驗止的適當選擇,才能獲得預期的結果。現將實驗常用抗凝劑及其使用方法簡述如下:

1、乙二胺四乙酸(EDTA)鹽 EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽。均可與鈣離子結全成螯合物,從而阻止血液凝固

Na2C10H14O8N2+CA2+→CAC10H12O8N2+2NA++2H+

EDTA鹽經1000C烘乾,抗凝作用不變,通常配成15g/L水溶液,每瓶0.4ml,乾燥後可抗凝5ml血液。EDTA鹽對紅、白細胞形態影響很小,根據國際血液學標準公委員會(International committee standard of hematology ,ICSH)1993年文件建議,血細胞計數用EDTA二鉀作抗凝劑,用量為EDTA-K2。2H2O1.5-2.2Mg (4.45±0.85μmol)/ml血液。EDTA-NA與EDTA-K2對血細胞計數影響均較小,但二鈉溶解度明顯低於二鉀,有時影響抗凝效果,其他抗凝劑不適合於血細胞計數。表1-1是幾種抗凝劑對白細胞計數的影響,EDTA影響小板聚集,不適合於作凝血象檢查和血小板功能試驗。

表1-1 不同抗凝劑不同條件保存血液的WBC變化(×109/L)

40C 200C 320C
30『1h 2h 4h 8h 30』1h 2h 4h 8h 30』1h 2h 4h 8h
EDTA-K2 6.6 6.5 6.56.5 6.5 6.5 6.5 6.56.5 6.5 6.4 6.5 6.56.5 6.5
EDTA-NA 6.3 6.2 6.36.4 6.5 6.3 6.3 6.46.3 6.4 6.3 6.3 6.46.3 6.3
肝素 5.6 4.9 5.3 5.14.23.6 5.6 5.6 5.65.3
敬椽酸鈉 6.5 6.2 6.05.6 5.6 6.4 6.3 6.26.0 5.8 5.9 5.9 6.05.8 5.7

2.枸椽酸鈉(trisodiumcitrate)枸椽酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物,從而阻止血液凝固。

2Na3C6H5O7+2CA2+→2CAC6H5O7-+6Na+

枸椽酸鈉有2Na3C6H5O7。和2Na3C6H511H2O等多種晶體。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l濃度),與血液按1:9或1:4比例使用。枸椽鈉對凝血V因子有較好的保護作用,使其活性減低緩,故常用於凝血象的檢查,也用於紅細胞沉降率的測定。因毒性小,是輸積壓保養中的成分之一。

由於枸椽酸鈉溶液是按體積肥比例加入血液內達到抗凝目的的,而抗凝劑主要是作用於積壓漿成分,通常所謂的1:9比例抗凝的概念是提1份體積的抗凝劑作用9份紅細胞比積正常血液內的血漿成分而言。所以台果對貧血紅細胞增多症患者的血液仍按1:9的比例加入抗凝劑時,就會發生抗凝劑足或相對過多,這將明顯地影響凝象檢查結果。為了避免這種現象,有文獻報導應根據抗凝劑用量(ml)=0.00185×血量×(100—病人紅細胞比積%)這一公式,來計算抗凝劑的用量。

3.草酸鈉(sodiumoxalate)草酸鹽可與血中鈣離子生成草酸鈣沉澱,從而阻止血液凝固。

草酸鈉通常用0.1mol/L濃度,與血液按1:9比例使用,過去主要用於凝務象檢查。實踐發現草酸鹽對凝備V因子保護功能差,影響凝血酶原時間測定效果;另外由於草酸鹽與鈣結合形成的是沉澱物,影響自動凝血儀的使用,因此,多數學者認為凝積壓象檢查選用枸椽酸鈉為抗凝劑更為適宜。

4.肝素(heparin)肝素廣泛在於肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細胞和暑鹼性粒細胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團的粘多糖,是分散物質,平均分子量為15000(2000-40000)。肝素可加強抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)滅活絲氨酸蛋白酶,從而具有阻止凝血酶形成,對抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5Iu 。儘管肝素可以保持紅細胞的自然形態,但由於其常可引起白細胞聚集關使用塗片在羅氏()染色時產生藍色背景,因此肝素抗凝血不適全血液學一般檢查。肝素是紅細胞透滲脆性試驗理想的抗凝劑。

32 靜脈采血法 | 血塗片的製備和細胞染色 32
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