載玻片
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材質:載玻片是在實驗時用來放置實驗材料的玻璃片,呈長方形,較厚,透光性較好;蓋玻片是蓋在材料上,避免液體和物鏡相接觸,以免污染物鏡,呈正方形,較薄,透光性較好。
作用:載玻片是用顯微鏡觀察東西時用來放東西的玻璃片,然後將蓋玻片放置其上,用作觀察生物。
用法:
1、塗片法是將材料均勻地塗布在載玻片上的一種製片方法。
塗片材料有單細胞生物、小型藻類、血液、細菌培養液、動植物的疏鬆組織、精巢、花藥等。
塗片時應注意:(1)載玻片必須清潔。(2)載玻片要持平。(3)塗層須均勻。塗抹液滴在載玻片中間偏右,用解剖刀刃或牙籤等塗勻。(4)塗層要薄。用另一載玻片作推片,沿滴有塗抹液的載玻片面(二載玻片夾角應為30°-45°)由右向左輕輕推動,塗成均勻一薄層。(5)固定。如需固定可用化學固定劑或乾燥法(細菌)固定。(6)染色。細菌用亞甲基藍,血液用瑞氏染液。染色液要蓋住全部塗面。(7)沖洗。用吸水紙吸干或烤乾。(8)封片。長期保存用加拿大的樹膠封片。
2、壓片法是將生物材料置於載玻片和蓋片之間,施加一定壓力,將組織細胞壓散的一種製片方法。
3、裝片法是將生物材料採取整體封固製成玻片標本的方法,用此法可製成臨時或永久裝片。
裝片材料有:微小生物如衣藻、水綿、變形蟲、水螅,植物的葉表皮;昆蟲的翅、足、口器,人的口腔上皮細胞等。
裝片法製作時應注意:(1)手持載玻片時,應注意持平,或放在平台上。滴水時水量要適當,以恰好被蓋玻片蓋滿為度。(2)應將材料用解剖針或鑷子展開不使重疊,展平在同一平面上。(3)放蓋玻片時,從一側慢慢蓋在水滴上,防止出現氣泡。(4)染色時,將一滴染色液滴在蓋玻片的一側,用吸水紙從另一側吸引,使蓋玻片下的標本均勻著色。著色後,用同樣的方法,滴一滴清水,把染色液吸出後,在顯微鏡下觀察。
4、切片 是用從生物體上切取的薄片製成的玻片標本。
因要求不同,可用刀片進行徒手切片,也可將組織塊包埋於石蠟或火棉膠中或以低溫冰凍,用切片機切片。切成5~10微米薄片,供光學顯微鏡觀察。用環氧樹脂或甲基丙烯酸包埋組織塊切制的超薄切片,其厚度在20~50奈米,專供在電子顯微鏡下觀察。一般教學用的如根尖、莖的切片通稱石蠟切片。
清理方法:用清水洗或用酒精洗,然後再用棉花或紗布擦乾淨(最好用擦鏡紙,手指避免接觸載玻片,以免在其上留下指紋,影響下次觀察使用)
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