高效液相色譜法

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高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)又稱高壓液相色譜高速液相色譜高分離度液相色譜近代柱色譜等,是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。

高效液相色譜是目前應用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似於氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。高效液相色譜法的輸液泵要求輸液量恆定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由於液體流動相粘度遠遠高於氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小於氣相色譜柱。

高效液相色譜法的特點

高效液相色譜法有「三高一廣一快」的特點:

此外高效液相色譜還有色譜柱可反覆使用、樣品不被破壞、易回收等優點,但也有缺點,與氣相色譜相比各有所長,相互補充。高效液相色譜的缺點是有「柱外效應」。在從進樣到檢測器之間,除了柱子以外的任何死空間(進樣器、柱接頭、連接管和檢測池等)中,如果流動相的流型有變化,被分離物質的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬,柱效率降低。高效液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。

高效液相色譜儀

高效液相色譜儀的結構和流程多種多樣。 高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進樣器、色譜柱、檢測器、恆溫器、記錄儀等主要部件。

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