解鏈溫度
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DNA的解鏈溫度(Tm)是引子的一個重要參數,它是當50%的引子和互補序列表現為雙鏈DNA分子時的溫度,一種DNA分子的Tm值大小與其所含鹼基中的G+C比例相關,G+C比例越高,Tm值越高。
Tm=4(G+C)+2(A+T)
Tm值為PCR反應退火溫度的重要參考依據。
通常將加熱變性使DNA的雙螺旋結構失去一半時的溫度稱為該DNA的熔點或溶解溫度(melting temperature),用Tm表示。當達到Tm時,DNA分子內50%的雙鏈結構被打開,即增色效應達到一半時的溫度,它在S型曲線上相當於吸光率增加的中點處所對應的橫坐標。
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