混合淋巴細胞培養
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混合淋巴細胞培養(MLC)或稱混合淋巴細胞反應(MLR)常用於器官移植前的組織配型,以測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由於MLC中淋巴細胞接受同種異型抗原的刺激而發生活化、增殖,產生種類眾多的細胞因子,促進NK、LAK和CTL等殺傷細胞的分化,因此又是免疫調節研究中常用的實驗模型。
兩個無關個體功能正常的淋巴細胞在體外混合培養時,由於HLAⅡ類抗原中D和DP抗原不同,可相互刺激對方的T細胞發生增殖,此為雙向混合淋巴細胞培養(two way MLC);若將其中一方的淋巴細胞先用絲裂黴素C(mytomycine C)處理或射線照射使之細胞中DNA失去複製能力,但仍能刺激另一方淋巴細胞發生轉化,稱為單向混合淋巴細胞培養(one way MLC)。兩個個體間HLA抗原差異程度越大,反應越強烈,可通過細胞數量、形態檢查或3H-TdR摻入率檢測反應細胞的增殖水平。如用經照射的、已知D位點抗原的純合子分型細胞(Homozygous typing cell,HTC)作為刺激細胞,則可檢測待檢者的D位點抗原型別。若待檢者抗原與標準HLA-D抗原相同,MLC不發生增殖,此為HLA-D抗原陰性分型法。EB病毒轉化的B淋巴母細胞表達高水平的HLAⅡ類抗原,常作為單向混合淋巴細胞培養中的刺激細胞。
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