Coombs試驗

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Coombs試驗抗人球蛋白試驗,是檢測血液中溫反應性抗體的一種方法,也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標。溫抗體中50%以上由IgG介導,其次為IgM,IgA和C3d等,因此本試驗應分選各種單株抗體同時測定。Coombs試驗分為直接試驗(直接反應)和間接試驗(間接反應):直接試驗的目的是檢查紅細胞表面的不完全抗體;間接試驗的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體

目錄

原理

不完全抗體(IgG)無法架接2個鄰近的紅細胞而只能和一個紅細胞抗原相結合。抗人球蛋白抗體是完全抗體,可與多個不完全抗體的Fc段相結合,導致紅細胞凝集現象,稱為抗人球蛋白試驗陽性。直接Coombs試驗陽性說明病人紅細胞表面上包被有不完全抗體(比如IgG)。而間接Coombs試驗陽性則說明病人血清中存在不完全抗體。


方法

(1)直接coombs試驗 :是測定吸附在紅細胞膜上的不完全抗體補體較敏感的方法,是診斷AIHA的重要依據。在生理鹽水內,吸附不完全抗體或補體的致敏紅細胞並無凝集,因為不完全抗體是單價的。加入完全、多價的抗人球蛋白抗體後,後者與不完全抗體Fc段相結合,起搭橋作用,可導致致敏紅細胞相互凝集,即直接Coombs試驗陽性。根據加入的抗人球蛋白不同,可鑒別使紅細胞致敏的是IgG抗體還是C3。

直接Coombs試驗.jpg

(2)間接coombs試驗:用於檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標本加入具有特異抗原的紅細胞懸液中,如果抗原抗體相應則發生結合,再加入抗球蛋白抗體,則出現紅細胞凝集。本法多用於檢測母體Rh(D)抗體以及因紅細胞不相容的輸血而產生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清,如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補體血清等,分析與紅細胞表面結合的不完全抗體的Ig亞類。

間接Coombs試驗.jpg

參考值

直接和間接Coombs』試驗均為陰性,也就是說正常人這兩個試驗都應該是陰性。

臨床意義

1.陽性:見於新生兒溶血病自身免疫性溶血性貧血AIHA)、SLE類風濕性關節炎惡性淋巴瘤、甲基多巴及青黴素型等藥物性溶血反應。

2.AIHI大多屬於溫抗體型(即於37°C條件下作用最強,主要為IgG),但也有小部分屬於冷抗體型(主要為IgM),故必要時於4°C條件下進行試驗,排除假陰性反應。

3.AIHA大多為IgG型抗體,還有IgG+C3型等,故應使用廣譜的抗人球蛋白血清進行試驗


參考文獻

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