室間隔位於左右心室之間。
室間隔中部明顯凸向右心室，凹向左心室，室間隔分為肌部和膜部。
且室間隔大部分為肌部，肌部由肌組織覆蓋心內膜而成。
膜部的上界為主動脈右瓣和後瓣下緣，前界和下界為室間隔肌部，後界為右心房壁。
膜部被三尖瓣隔側尖的附著緣分為房室部和室間部。
室間部範圍甚小，且室間隔缺損多發生在室間隔膜部的室間部。
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