醫用化學/比色分析應用示例——鐵的含量測定
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一、原理
應用比色分析測定溶液中伯的含量有硫氰酸鹽顯色法、磺基水楊酸法及鄰菲羅啉顯色法等各各種方法。現以磺基水楊酸法為例介紹鐵的含量測定。
在不同酸度下，Fe3+和磺基水楊酸生成組成不同的配合物。若控制溶液PH值在8-11.5的條件下顯色，可生成配位數為6的黃色三磺基水楊酸合鐵配合物。反應式如：
上式可簡寫為
溶液的最大吸收波長λmax=420nm，因此可在420nm 處進行測定（若用光電比色計測定可選擇藍色光片）。此方法適合於測定無大量Cu2+、Ca2+、Cr3+、Ni2+電漿存在的溶液中鐵離子的含量。
二、操作步驟
（一）標準曲線的繪製
稱取一定量硫酸鐵銨［NH4Fe(SO4)2.12H2O］用蒸餾水溶解，加適量配製成含 Fe3+0.1lg.L-1的標準溶液，再稀釋成含Fe3+0.025mg.L-1的操作溶液。
取25ml容量瓶6隻，編號後分別加入操作溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00及5.00ml，各加入10%NH4CL溶液2ml和10%磺基水楊酸溶液2ml，滴加氨水至溶液由紫紅色變為黃色，並使氨水稍過量，然後用NH4CL-NH3緩衝溶液稀釋至刻度，搖勻，以1號為空白，在420nm處依次測定吸光度。以Fe3+含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪製標準曲線。
（二）樣品的測定
取25ml容量瓶1隻，準確加入經過處理的濃度在標準範圍內的被測溶液，按上面標準系列配製的同樣加入等量的顯色劑和緩衝溶液，在相同條件下測定被測溶液的吸光試，利用標準曲線找出樣品溶液的濃度，根據樣品溶液的稀釋倍數，求出樣品的含量。
例如，用磺基水劣根性酸法比色測定微量鐵含量。稱取0.432g硫酸鐵銨溶於水，加18%硫酸溶液1ml，轉移至500ml容量瓶中，用水定容，作為標準溶液，其濃度為0.1g.L-1。取下列不同體積的上述溶液於50ml容量瓶中，加入顯色劑後定容，在420nm處測定吸光度，結果如下：
| 溶液體積/ml | 1.00 | 2.00 | 3.00 | 4.00 | 5.00 |
| 吸光度A | 0.097 | 0.200 | 0.304 | 0.408 | 0.510 |
| c/(g.L-1)×103 | 2.00 | 4.00 | 6.00 | 8.00 | 10.00 |
以吸光度A值為縱坐標，標準溶液中Fe3+含量為縱坐標作圖，即得如圖8-12的標準曲線。
吸取待測液樣品5.00ml於50ml容量瓶中，加入顯色劑後定容，其方法與繪製標準曲線相同，測得吸光度為0.341。由標準曲線查得A為0.341時，c為6.60×10-3g.L-1。故樣品溶液中鐵離子的濃度為
c=6.60×10-3×50.00×1/5.00
=6.6×10-2(g.L-1)
圖8-12 磺基水楊酸法測定鐵的標準曲線
 比色分析的測量方法 | 膠體溶液  |
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