凝膠層析

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凝膠層析是按照蛋白質分子量大小進行分離的技術,又稱之凝膠過濾,分子篩層析或排阻層析。單個凝膠珠本身象個"篩子"。不同類型凝膠的篩孔的大小不同。如果將這樣的凝膠裝入一個足夠長的柱子中,作成一個凝膠柱。當含有大小不同的蛋白質樣品加到凝膠柱上時,比凝膠珠平均孔徑小的蛋白質就要連續不斷地穿入珠子的內部,這樣的小分子不但其運動路程長,而且受到來自凝膠珠內部的阻力也很大,所以越小的蛋白質,把它們從柱子上洗脫下來所花費的時間越長。凝膠中只有很少的孔徑可接受大的蛋白。因此,大的蛋白質直接通過凝膠珠之間的縫隙首先被洗脫下來。凝膠過濾所用的凝膠孔徑大小的選擇主要取決於要純化的蛋白質分子量。

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