柱色譜法

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柱色譜法又稱柱層析。固定相裝於柱內,流動相為液體,樣品沿豎直方向由上而下移動而達到分離的色譜法。它既區別於用於分離分析的GC和HPLC法,也區別於樣品在平面形固定相內移動的紙層析和薄層色譜法。本法主要用於分離,有時也起到濃縮富集作用。在環境分析測試中,本法廣泛用於樣品的前處理,如在水和氣溶膠的有機污染分析中,將萃取液轉移到層析柱內,而後用環己烷洗脫烷烴部分,用苯洗脫多環芳烴類污染物,用乙醇洗脫極性組分;在土壤分析中,用氧化鋁柱捕集分離稀土元素釷、鉈等。

吸附柱色譜通常在玻璃管中填入表面積很大經過活化的多孔性或粉狀固體吸附劑。當待分離的混合物溶液流過吸附柱時,各種成分同時被吸附在柱的上端。當洗脫劑流下時,由於不同化合物吸附能力不同,往下洗脫的速度也不同,於是形成了不同層次,即溶質在柱中自上而下按對吸附劑的親和力大小分別形成若干色帶,再用溶劑洗脫時,已經分開的溶質可以從柱上分別洗出收集;或將柱吸干,擠出後按色帶分割開,再用溶劑將各色帶中的溶質萃取出來。

柱色譜法column chromatography 將色譜填料裝填在色譜柱管內作固定相的色譜方法。根據色譜柱的尺寸、結構和製作方法的不同,又可分為填充柱色譜和毛細管柱色譜。

本實驗成敗的關鍵是:裝柱要緊密,要求無斷層、無縫隙;在裝柱、洗脫過程中,始終保持有溶劑覆蓋吸附劑;一個色帶與另一色帶的洗脫液的接受不要交叉。

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